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DiOC2(3)是一种膜电位探针，可通过流式细胞仪检测根据发射波长荧光信号比来分析细菌活力。DiOC2(3)常用来测定细菌膜电位，也能用于研究某些活细胞比如大鼠胚胎成纤维细胞、猴肾细胞、中国仓鼠肺成纤维细胞和小鼠3T3成纤维细胞。

DiOC2(3)用来检测细菌膜电位的工作原理在于：DiOC2(3)在所有细菌细胞内发绿色荧光，由于更高的膜电位引起染料分子发生自聚作用，使得染料的荧光往红色发射波长处迁移，红色荧光强度增高，此时红色/绿色荧光信号比高。质子离子载体比如CCCP，通过去除质子梯度来破坏线粒体膜电位，从而导致红色荧光强度降低，此时红色/绿色荧光信号比降低。DiOC2(3)的最大激发和发射波长约482nm和497nm。经DiOC2(3)标记的细胞用流式细胞仪分析（用488nm激发，分别用适合FITC（绿色）和Texas Red（红色）的发射滤片来检测）。

主要参数：
CAS NO.：905-96-4
分子式：C₂₁H₂₁IN₂O₂
分子量：460.31
纯度：＞95.0%(HPLC)
Ex/Em：482/497nm（in methanol）
外观：红色粉末或结晶
溶解性：溶于DMSO，DMF，无水乙醇，微溶于水
结构式：

保存：-20℃避光干燥保存，至少一年有效。

• 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 染色液制备
  
  • 储存液制备：用DMSO或无水乙醇配置浓度1～5mM的储存液。例如，取10mg DiOC2(3)（Mw：460.31g/mol）溶于4.35mL无水DMSO中，充分溶解，即得到5mM的储存液。
    注意：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。
    
  • 工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到合适的工作浓度。
    注意：工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。
• 染色方法
  对于细菌染色，最好取对数生长期的健康细菌，用无菌PBS或其他适当平衡盐缓冲液稀释到~1 x 106cells/ml。也可直接从细菌培养液中取适量的细菌不经清洗进行稀释。细菌染色用DiOC2(3)的工作浓度可为30μM，室温染色15～30min。
  
• 染色示例
  
  Detection of membrane potential in mycobacteria.Red/green ratios were calculated using population mean fluorescence intensities for mycobacteria,incubated with 3μM DiOC2 for 30min in either the presence or absence of 25μM CCCP.

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